Megazyme試劑盒的使用步驟

Megazyme試劑盒將目標抗體包被于微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的生物素抗體洗凈后，加入標記和親和素，在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色，顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關，用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，計算樣品濃度。

　　該試劑盒經過改進后，更加快速和靈敏，靈敏度是傳統己糖激酶法的兩倍，成本低，試劑配制后可穩定保存2年， 采用試劑盒形式，包含檢測必需的所有酶，提供計算軟件，使數據處理更方便，包含標準品。原理上，將單位體積的谷物面粉提取物或發酵肉湯培養基在條件下用底物混合物孵育，通過加入弱堿性溶液終止反應并使溶液變色，測定400nm下的吸光度值，該值與樣品中α-淀粉酶的含量直接相關。         

　　Megazyme試劑盒操作步驟

　　①從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

　　②設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

　　③樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

　　④除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

　　⑤棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次。